El sicario: Room 164 gaat over een huurmoordenaar. Hij heeft honderden mensen gedood, is een expert in foltering en ontvoering en vele jaren was hij een commandant van de rijkswacht in Chihuahua. Hij ontving zelfs een opleiding van de FBI. Op dit moment is er een contract op zijn leven van 250.000 dollar. Hij leeft als een voortvluchtige, maar hij is nog steeds vrij en is in nog geen enkel land aangeklaagd voor een misdrijf.